Terapia Epigenómica en Hepatitis B

Tema

MicroRNA-20 induce la metilación del ADN circular cerrado covalentemente del virus de la hepatitis B en células de hepatoma humano

Mecanismo epigenómico tratado 

Metilación del ADN, para suprimir la actividad transcripcional del virus de la hepatitis B (VHB) en los hepatocitos. Los microARN (miARN / miR) regulan la expresión de genes de mamíferos a nivel postranscripcional dirigiendo el complejo silenciador inducido por ARN (RISC) a objetivos complementarios de ARNm y, posteriormente, induciendo represión traduccional y / o desestabilización de ARNm.

Cómo se lo hizo

Se utilizaron células HepAD38 que soportan la replicación del VHB bajo el control de un promotor inducible por tetraciclina y se propuso que, en las células de hepatoma humano, miR-20a se carga en AGO2, que luego se transloca en el núcleo para inducir la metilación del ADN del VHB, lo que lleva a la supresión de la replicación del VHB; sin embargo, el mecanismo subyacente por el cual el ADNc de HBV se metila aún no se ha dilucidado.

Resultados 

Investigaron si miR‑20a puede funcionar como un efector endógeno de la metilación del ADN del VHB. Los resultados indicaron que la sobreexpresión de miR-20a podría suprimir la actividad replicativa del VHB y aumentar el grado de metilación del ADNc de HBV en la línea celular de hepatoma HepAD38.

En conclusión, miR-20a humano puede modular el de novometilación del ADN nuclear del VHB en una línea celular de hepatoma. Hasta donde sabemos, este es el primer estudio que investiga la metilación del genoma del VHB sobreexpresando miRNA.

Obtenida con fines académicos de: https://image2.slideserve.com/4187142/slide26-l.jpg

Referencias Bibliográficas:

1. Moon, IY, Choi, JH, Chung, JW, Jang, ES, Jeong, S. y Kim, J. (2019). MicroRNA-20 induce la metilación del ADN circular de virus de la hepatitis B cerrado covalentemente en células de hepatoma humano. Molecular Medicine Reports, 20, 2285-2293. https://doi.org/10.3892/mmr.2019.10435

Técnica de edición de Ácidos nucleicos en Hepatitis B

Tipo de edición

Terapia génica de células somáticas, en este caso ya sea ex-vivo, mediante la obtención de células del paciente, la transferencia del material genético mediante el uso de un vector y la reimplantación en el paciente.O in-vivo, se administra el material genético directamente al paciente.

Dirigido hacia

Genoma del virus de hepatitis B (guías dirigidas al núcleo, polimerasa y X ORF)

Dirigido por

Plataforma Crispr/Cas9; 24 ARN guías únicas, sgRNA (sg17 y sg21, más eficaces)

Órgano a tratar

Hígado, células hepatocito.

Vía de administración

Vía intravenosa (caudal, mediante inyección hidrodinámica)

Resultados a corto plazo 

Promover mutaciones en el genoma del VHB

Inactivación del cccDNA como consecuencia de las rupturas de ADN, además de su reducción en hepatocitos infectados.

Resultados a mediano plazo

Inhibir las infecciones por VHB con el sistema Crispr/Cas9

Resultados demostrados pueden usarse para informar el desarrollo de terapias basadas en CRISPR / Cas9 para otros virus de ADN, como los herpesvirus y los virus del papiloma que usan un ADN episomal como plantilla para su expresión y replicación génica.

Resultados a largo plazo

Puede representar un paso significativo hacia la cura de la infección crónica por el VHB.

Desarrollo de futuras estrategias antivirales dirigidas a cccDNA para la escisión endonucleolítica.

Identificar sgRNAs dirigidos a otra región del genoma del VHB que podría inactivar el ADNcc.

Referencias Bibliográficas:

1. Ramanan, V., Shlomai, A., Cox, D. B., Schwartz, R. E., Michailidis, E., Bhatta, A., … Bhatia, S. N. (2015). CRISPR/Cas9 cleavage of viral DNA efficiently suppresses hepatitis B virus. Scientific reports, 5, 10833. doi:10.1038/srep10833